

詳細介紹
蔡司LSM 990
集多種成像技術于一體的多功能共聚焦系統
蔡司LSM 990突破性地集多種成像技術于一身,助您揭示研究的新層面。憑借精細至90 nm超分辨,高速體成像或一次性拆分10種以上熒光標記,您可以清晰精準地深入研究您的生物樣品。通過這款共聚焦顯微鏡,您可突破活體成像和實驗設計的極限,了解分子動力學、蛋白質相互作用和各種生理學過程。
自由探索
從純粹的共聚焦系統到集成所有可用模式的成像平臺,蔡司LSM 990可以根據您的成像需求進行多樣配置。如希望利用特定優勢來滿足您嚴苛的應用要求,我們建議您選擇以下配置中的一種,或根據需要進行組合。

共聚焦顯微鏡已成為優良光學切片和靈活成像的代名詞,沒有其他顯微鏡能夠適應如此豐富的樣品和實驗類型。蔡司LSM 990將快速超分辨成像、突破性的瞬時體成像、出色的深度以及能在單次圖像掃描中對10種以上標記進行實時光譜拆分的功能集于一身,從而將這款共聚焦的多功能性提升到了新的高度。此外,蔡司LSM 990還支持光操作或分子動力學測量,實現熒光成像外的新發現。所有系統組件,特別是Airyscan 2、Lightfield 4D和多達36個光譜檢測器,均為實現的活體成像而開發。LSM 990讓您在實驗設計中釋放創造力,并推進您的科學探索!

三日齡小鼠原代類器官。小腸的分泌細胞在頂端F-肌動蛋白刷狀緣上產生孔洞。DAPI(白色):DNA,鬼筆環肽(綠色):F-肌動蛋白,UEA-1(紅色):分泌細胞(潘氏,杯狀),COX-1(紫色):簇細胞。
共聚焦成像的精髓
大型樣品的高分辨光學切片成像
三日齡小鼠原代類器官。小腸的分泌細胞在頂端F-肌動蛋白刷狀緣上產生孔洞。DAPI(白色):DNA,鬼筆環肽(綠色):F-肌動蛋白,UEA-1(紅色):分泌細胞(潘氏,杯狀),COX-1(紫色):簇細胞。
由德國斯圖加特大學的Fabian G?rtner提供

果蠅睪丸中的精子鞭毛。DAPI用于DNA(顯示細胞核和精子),使用鬼筆環肽標記F-肌動蛋白。54層序列圖像的最大強度投影。
Airyscan
對微小結構進行低光毒性超分辨成像
Airyscan檢測器不再讓信號通過針孔到達檢測器,而是由32個檢測器單元組成,每個檢測器單元都相當于一個小的針孔,在每個掃描位置都獲得焦平面信息。通過將32個檢測器單元組合成一個大靶面陣列檢測器,Airyscan可以收集到更多熒光信號,捕捉到結構的高頻信息。
果蠅睪丸中的精子鞭毛。DAPI用于DNA(顯示細胞核和精子),使用鬼筆環肽標記F-肌動蛋白。54層序列圖像的最大強度投影。

在整個小鼠大腦中對錐體神經元(YFP-H)和小膠質細胞(CxCR3-GFP)成像。
多光子顯微鏡
從組織深處獲取信息
多光子顯微鏡非常適合還原大腦、整個生物體、類器官或細胞團等活體樣品或透明化組織中的深層信息。較長的激發波長(690 - 1300 nm)被組織吸收和散射的程度較低,無需針孔即可實現光學切片。
在整個小鼠大腦中對錐體神經元(YFP-H)和小膠質細胞(CxCR3-GFP)成像。
樣品由德國波恩DZNE的Severin Filser提供

LSM Plus
提升您的共聚焦體驗
LSM Plus可輕松改善任何共聚焦實驗,且不受檢測模式或發射光范圍的限制。其線性維納濾波去卷積無需過多的手動設置,就能確保提供可靠的定量結果。系統的物鏡、折射率和發射光檢測范圍等基本光學特性信息可用于自動調整處理參數,以獲得理想效果。
果蠅卵巢,F-肌動蛋白(鬼筆環肽,品紅色)和DE-鈣粘蛋白(青色)染色。
樣品由德國明斯特大學Luschnig工作小組的T. Jacobs和明斯特成像網絡的T. Zobel提供

Lightfield 4D
對發育動物的高流動性細胞進行高速體成像
要真正捕捉生命過程的本質,必須進行四維成像,因為體積和時間對于研究生命系統都至關重要。Lightfield 4D提供了獨特的解決方案,能夠在精準的時間點對整個體積進行成像,沒有任何時間延遲。
受精后3日跳動的斑馬魚胚胎心臟。以每秒80個體積的速度在1.2秒內采集3次完整心跳。
由英國謝菲爾德大學生物科學學院的Stone Elworthy和Emily No?l提供
熒光標記的識別和可靠的分離是每個多色實驗的基礎,隨著染料的選擇范圍擴大至近紅外(NIR)范圍,并且用于多光譜的生物標記物可以讓我們同時鑒別更多結構,這一基礎變得愈發重要。多達36個檢測通道確保每個波長波段都有理想的量子效率,單次圖像掃描即可獲得380 nm至900 nm的發射光檢測范圍。您可以為每個標記選擇所需的檢測范圍以提高結果的準確性,或在所需的發射光檢測范圍內利用所有通道,在單次掃描中收集每個熒光基團的完整光譜信息。光譜拆分還可與提升分辨率及信噪比的LSM Plus技術在同一處理流程中完成,讓多維實驗的采集效率達到最高。

出芽酵母(釀酒酵母)細胞壁的高級多光譜分析技術:使用5個激光器和36個檢測器在一條軌跡中采集的13個熒光標記和自發熒光,不含自發熒光的13個熒光標記的未混合圖像。
樣品由ZEISS Microscopy GmbH的Michal Skruzny提供

通過Lambda掃描獲得5色大腦切片樣品,并使用LSM Plus進行處理。光譜拆分后的通道:DAPI、Map2-A488、Parvalbumin-A568、Iba-1-A647、VGAT-A750、自發熒光。
樣品由葡萄牙科英布拉大學CNC科英布拉顯微成像中心的Luisa Cortes提供

Cos-7 cells, DAPI (magenta), Anti-tubulin Alexa 568 (blue), Actin Phalloidin-OG488 (yellow) and Tom20-Alexa 750 (red). Imaged in Lambda mode across the visible and near infrared (NIR) spectrum. Individual signals separated by Linear Unmixing. Maximum intensity projection of a z-stack.
Cos-7細胞、DAPI(品紅色)、微管蛋白抗體Alexa 568(藍色)、肌動蛋白鬼筆環肽-OG488(黃色)和Tom20-Alexa 750(紅色)。Lambda模式下在可見光到近紅外(NIR)光譜范圍內成像。線性拆分技術分離各個信號。Z軸序列圖像的最大強度投影。
樣品由瑞士蘇黎世大學ZMB的Urs Ziegler和Jana Doehner提供
不止于成像
洞察分子動力學和蛋白質相互作用
超越熒光成像限制,為您的實驗增添新維度。利用熒光相關光譜(FCS)和光柵圖像相關光譜技術(Spectral RICS),您可以同時深入了解多個標記的蛋白質濃度、運動和相互作用。Airyscan檢測器提供的空間信息可以讓您了解蛋白質的分子行為,深入探究血流或微流控系統(如器官芯片裝置)內的動態。熒光壽命顯微成像技術(FLIM)捕捉熒光基團的其他特性,實現生理學過程研究,并擴展激光共聚焦顯微鏡的功能,如獲取蛋白質間的相互作用信息,以及pH值、氧或鐵濃度等環境參數信息。

Measurement of speed and direction of blood flow in vessels of zebrafish larvae
僅需一次簡單輕松的測量,即可了解活體樣品中熒光蛋白的分子濃度、非對稱擴散和流動動態。從細胞培養、類器官到整個生物體——您可輕松對當前實驗中的分子進行更深入的剖析。
測量斑馬魚幼體血管的血流速度和方向。
由德國萊布尼茨老齡化問題研究所Fritz Lipmann Institute(FLI)的V.Hopfenmüller提供

蔡司Spectral RICS將LSM成像與蛋白質在細胞環境中的行為信息結合起來,
SUMO化對蛋白質擴散的影響:RICS可用于測量蛋白質相互作用導致的分子擴散變化。通過標準自相關RICS分析,可以看到擴散系數隨著SUMO鏈的變小而下降。此類研究還可以測量感興趣的標記蛋白質在藥物治療、突變或其他影響下的擴散變化。
樣品由德國耶拿萊布尼茨老齡化研究所影像中心的P. Hemmerich和T. Ulbricht友情提供
熒光壽命成像顯微技術(FLIM)
FLIM考慮到了熒光壽命會受到多種因素的影響,如離子或氧濃度、pH值和溫度等。FLIM可用于分析分子間的距離和相互作用。
U2OS細胞用Flipper-TR染色。可測量小于100 ps的熒光壽命差異。
樣品由英國曼徹斯特大學的Sarah Woolner博士提供。

技術洞見
優良的光效率、靈敏度和光譜功能

光路設計

LSM 990優良的光路設計、高帶寬電子元件和優質光學器件確保了其高水平的光效率、高動態范圍和寬廣的波長檢測范圍。這些特性使其能夠對多種樣品和結構、分子特征以及多光譜信息進行高質量的采集。
檢測器結構

LSM 990可配備一個32通道的GaAsP檢測器,并輔以兩個側面檢測器和兩個可選配的NIR GaAs和GaAsP檢測器。這一特殊配置為激光共聚焦顯微系統提供了數量眾多的檢測器。在多標記實驗中,能夠使用適配的檢測器收集每個熒光標記的發射光范圍。
從圖像到數據助您進行更多探索的一系列功能
LSM 990結合了激光點照明技術、線性掃描以及能在光子計數模式下采集信號的檢測器,它已不僅僅是一個成像設備,還可為您提供以下功能:
光譜型光柵圖像相關光譜(Spectral RICS)可逐幀生成細胞或其他結構分子濃度和擴散系數指示熱圖。利用Spectral RICS,可在分析蛋白質相互作用之前對熒光信號進行光譜拆分。
熒光相關光譜(FCS)能助您無損觀察分子濃度和擴散過程,從而更深入地了解細胞功能。為了在單分子基礎上進行測量,您可以使用單光子或多光子激光線,并使用最高可至900 nm的全發射范圍。
熒光互相關光譜(FCCS)可讓您觀察兩個或多個不同標記分子間的相互作用。在配置了眾多檢測器的LSM 990系統上,FCCS實驗最多可檢測9個通道。
熒光壽命顯微成像技術(FLIM)可利用熒光壽命的差異來分離組分。其可利用熒光壽命會受到多種因素的影響來進行功能成像,如測量離子或氧濃度、pH值和溫度等。FLIM還可用于FRET測量,分析分子間的接近程度和相互作用。
熒光共振能量轉移(FRET)利用敏化發射或受體光漂白法來研究蛋白質的相互作用和距離。
熒光漂白后恢復(FRAP)利用任意激光譜線來進行靈活的受體光漂白實驗。同樣的原理通常也適用于光操作實驗,例如研究細胞內運動,或通過熒光蛋白標記的光轉換跟蹤生物體內整個細胞的運動。
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